ﻫﻤﺴﺎﻧﻪ ﺳﺎزی و ﺑﯿﺎن ژن ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦ عامل نورون زایی مشتق شده از مغز در باکتری اشریشیاکلای

عامل نورون زایی مشتق شده از مغز1 (bdnf) زیرمجموعه ای از خانواده ی عوامل نورون زایی است که به مقدار زیاد در سیستم عصبی به خصوص هیپوکامپوس و پوشش مغز وجود دارد. این پروتئین در ابتدا 247 اسیدآمینه دارد که در پردازش های بعدی بخشی از آن بریده شده و تنها 119 اسیدآمینه باقی می ماند. پروتئین bdnf بالغ به بیرون یاخته تراویده شده و به گیرنده های تروپومیوزین کیناز b متصل می شود . اتصال به گیرنده سبب راه اندازی دسته ای از آبشارهای داخل یاخته ای از جمله 2 ras-map کیناز می شود. این آبشارها در رشد و تمایز نورون ها و همچنین ایجاد سیناپس نقش دارند. هدف از این پژوهش همسانه سازی و بیان ناحیه عملکردی پروتئینbdnf در اشریشیاکلای و سویه bl21 بود. توالی ژن مربوط به این بخش دارای 357جفت باز است که به صورت سنتز شده درون ناقل puc57 تهیه شد. این ناقل به درون باکتری ترانسفورم شد و به میزان زیاد تکثیر شد. ناقل تکثیرشده پس از تیمار با آنزیم های محدودکننده ی xho1 و bamh1 درون ناقل pet26bقرار گرفت. در مرحله ی بعد ناقل نوترکیب درون باکتری اشریشیا کلای و سویه 10 top ترانسفورم شد و به میزان زیاد تکثیر یافت. سپس ناقل نوترکیب استخراج و جهت بیان ژن مورد نظر به داخل باکتری اشریشیاکلای سویه bl21 ترانسفورم شد. آنالیز sdspage بیان پروتئین در باکتری را تایید کرد.